大黄素对人慢性髓细胞性白血病K562细胞增殖与凋亡及c-myc基因表达的影响

目的:观察中药大黄素对人慢性髓细胞性白血病K562细胞株的增殖与凋亡及c-myc基因表达的影响。方法:采用MTT法测定细胞的增殖抑制率,实验组、对照组和药物试验组应用荧光染色法观察不同浓度大黄素作用后细胞形态的改变判定凋亡效果,DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞内DNA的损伤程度,流式细胞仪分析细胞周期变化,RT-PCR法检测大黄素作用前后c-mycmRNA表达水平的变化。结果:大黄素对K562细胞具有明显的抑制作用,并呈浓度和时间依赖性(P<0.01),其96h半数抑制浓度(IC50)约为53.28μmol/L。大黄素作用96h后,荧光显微镜下可见细胞核不规则,核碎裂呈新月形改变,DNA琼脂糖凝胶电泳显示,基因组DNA显现典型的凋亡细胞的梯状图谱。流式细胞仪检测可见大黄素影响细胞周期,细胞阻滞于G0/G1期。RT-PCR法检测显示c-myc基因表达减弱(P<0.01),100μmol/L大黄素作用后表达强度较对照组减少54%。结论:大黄素能有效抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能是使细胞受阻于G0/G1期而进入凋亡程序,c-myc表达降低可能是大黄素诱导白血病细胞凋亡重要途径之一。