大鼠胃壁细胞胃泌素受体的放射配基结合法

被引:8
作者
聂克
王汝俊
王建华
机构
[1] 山东中医药大学肿瘤实验室
[2] 广州中医药大学脾胃研究所
基金
广东省自然科学基金;
关键词
胃泌素受体; 放射配基受体结合实验方法; 壁细胞; 大鼠;
D O I
暂无
中图分类号
R965 [实验药理学];
学科分类号
摘要
目的 建立大鼠胃壁细胞胃泌素受体放射配基结合实验方法。方法 以12 5I [Leu15] gastrin17 I为标记配基 ,以大鼠胃壁细胞悬液为受体制备 ,反应体系总体积为 2 0 0 μl,37℃恒温水浴振荡孵育 30min ,以 49型玻璃纤维滤膜分离结合和游离配基。结果 胃泌素受体结合符合简单单位点结合模型 ,Scatchard作图求出胃泌素受体结合参数Bmax=4 46 0 4× 10 -12 mol·L-1,Kd=1 2 49× 10 -10 mol·L-1。单点法求出特异结合位点数 70 3 2sites·cell-1。细胞浓度在0 2 5× 10 9~ 2× 10 9cells·L-1范围内 ,与标记配基特异性结合容量成正比。同一样品特异结合测定方法变异系数为7 0 4%。竞争抑制实验证明12 5I Gastin与大鼠胃壁细胞结合特异性良好。结论 大鼠胃壁细胞胃泌素受体的放射配基结合实验方法符合受体结合实验方法学要求
引用
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共 3 条
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