苏云金芽孢杆菌cry基因PCR-RFLP鉴定体系的建立

被引：115

作者：

宋福平

张杰

谢天健

杨自文

戴莲韵

李国勋

机构：

[1] 中国农业科学院植物保护研究所

[2] 中国农业科学院生物技术研究中心

[3] 湖北省农业科学院Ｂｔ研究开发中心

[4] 中国林业科学院森林保护研究所

[5] 东北农业大学昆虫科学系

来源：

中国农业科学 | 1998年 / 03期

关键词：

PCR-RFLP；苏云金芽孢杆菌；cry基因;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q939.1, [];

学科分类号：

071005 ; 100705 ;

摘要：

根据苏云金芽孢杆菌（Ｂｔ）ｃｒｙ２、ｃｒｙ３和ｃｒｙ４／ｃｒｙ１０型基因的保守区分别设计了３对通用引物Ｓ５ｕｎ２／Ｓ３ｕｎ２、Ｓ５ｕｎ３／Ｓ３ｕｎ３和Ｓ５ｕｎ４／Ｓ３ｕｎ４。ＰＣＲ扩增产生约１．２ｋｂ、１．４ｋｂ和１．５ｋｂ的产物，然后分别用ＨｉｎｃＩ／ＭｓｐＩ、ＢｇｌＩ／ＰｓｔＩ和ＢｓｔＥＩ／ＤｒａＩ酶切，并经ＲＦＬＰ分析鉴定Ｂｔ菌株的ｃｒｙ基因型。利用该方法对含已知ｃｒｙ２、ｃｒｙ３和ｃｒｙ４／ｃｒｙ１０型基因的Ｂｔ菌株和遗传工程菌进行基因分析，得到的结果与预测的ＲＦＬＰ相符，证明该方法可行。在此基础上对１４株Ｂｔ分离株的基因型进行了鉴定，其中有９株分离株含ｃｒｙ２型基因；仅菌株Ｂｔ２２含ｃｒｙ３型基因；所有被测菌株均不含ｃｒｙ４／ｃｒｙ１０型基因。

引用

页码：13 / 18

页数：6