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小鼠白介素18与白介素1β转化酶共表达载体的构建及真核表达
被引：4
作者：
徐玢
马小彤
董成亚
石洋
林永敏
宋玉华
吴克复
机构：
[1] 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室
[2] 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室 天津
[3] 天津
来源：
关键词：
小鼠白细胞介素18;
真核表达载体pIRES;
L1210白血病细胞;
肿瘤疫苗;
D O I：
暂无
中图分类号：
R733.7 [白血病];
学科分类号：
100214 ;
摘要：
为了制备白介素18前体(proIL-18)和白介素1β转化酶(ICE)共表达肿瘤疫苗,从小鼠脾细胞克隆proIL-18和ICE基因,构建小鼠proIL-18和ICE共表达质粒(pIRES-proIL-18-ICE),经测序证实序列正确后,脂质体法转染小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210,筛选稳定表达细胞株。转染细胞RT-PCR及转染细胞培养上清IL-18ELISA检测结果表明,肿瘤细胞可以表达并分泌成熟的IL-18。培养上清的IL-18可显著诱导ConA刺激的小鼠脾细胞产生IFN-γ,表明其具有功能活性。生长曲线和细胞周期实验证实与未转染的肿瘤细胞相比,转染空载体pIRES、pIRES-proIL-18、pIRES-ICE、pIRES-proIL-18-ICE基因对肿瘤细胞生长增殖无明显影响。IL-18白血病瘤苗的成功制备表明,利用pIRES载体在同一肿瘤细胞中共表达的proIL-18和ICE能够完全模拟生理过程,在真核细胞内有效酶切,分泌出成熟并有功能活性的IL-18;构建的IL-18瘤苗为进一步评价其在小鼠体内的抗白血病效果奠定基础。
引用
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页数：5
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