补肾健脾活血方含药血清调控P38信号通路促进去卵巢大鼠BMSCs成骨分化研究

目的:观察补肾健脾活血方含药血清调控P38信号通路定向诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的机制。方法:切除SD大鼠双侧卵巢,造成大鼠去势,建立骨质疏松症模型,分离、纯化、培养与传代大鼠BMSCs。随机分为正常组、模型组、成骨诱导组、中药组。茜素红染色检测各组的钙化结节情况,放免分析方法测定骨钙素(BGP)含量,免疫组织化学方法检测成骨标记物碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)、活化蛋白激酶(P38)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达。结果:培养7天、14天钙化结节数、BGP含量,正常组、成骨诱导组、中药组与模型组比较,差异均有非常显著性意义(P<0.01);成骨诱导组、中药组与正常组比较,差异均有非常显著性意义(P<0.01);成骨诱导组与中药组比较,差异均无显著性意义(P>0.05)。正常组和模型组可见少量ALP、OPN阳性细胞,成骨诱导组、中药组较正常组和模型组见大量ALP、OPN阳性细胞(P<0.01)。模型组较正常组P38、TNF-α表达低,中药组P38、TNF-α表达上调。结论:补肾健脾活血方含药血清通过激活P38信号传导通路,上调成骨细胞转录因子表达,促进去势大鼠BMSCs向成骨分化。