2 Gy X射线对EL-4细胞p16、CyclinD、CDK4基因转录和蛋白表达影响

目的　研究电离辐射对EL 4细胞p16、CyclinD、CDK4基因转录及蛋白表达的影响。探讨p16 CyclinD CDK4负向调控通路在辐射诱导G1期阻滞中的作用。方法　采用半定量RT PCR方法检测 2GyX射线照射后EL 4细胞p16mRNA水平变化 ,采用Northernblot方法检测CyclinD、CDK4基因转录变化 ,应用免疫细胞化学方法 (ICC)检测 3种蛋白表达的变化。结果　 2GyX射线照射后 2～ 4 8hEL 4细胞p16mRNA水平增高 ,4 8h恢复至正常水平。p16蛋白表达照射后 2h开始增高 ,12h达到峰值 (P <0 0 1) ,72h恢复至正常水平。EL 4细胞周期蛋白CyclinDmRNA水平于照射后 1h开始明显降低 ,照射后 8h降至最低值。CyclinD蛋白表达于照射后 8h开始明显减少 ,持续至照射后4 8h (P <0 0 5～P <0 0 1)。EL 4细胞CDK4mRNA水平于照射后 1h明显降低 ,照射后 4h～ 12h保持较低水平 ,72h恢复至正常水平。CDK4蛋白表达于照射后 4h明显下降 ,12h降至最低 ,72h仍低于正常水平 (P <0 0 1)。结论　 2GyX射线照射可诱导EL 4细胞p16表达增高 ,CyclinD和CDK4表达降低。提示p16 CyclinD CDK4负向调控通路可能在电离辐射诱导EL 4细胞G1期阻滞中发挥重要作用。