大鼠胚胎小脑提取液神经营养活性成分的分析

本实验观察了不同胎龄大鼠的小脑提取液（ｃｅｒｅｂｅｌｌｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｓ， ＣＥ）对体外培养小脑及脊髓神经细胞的影响。并采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ ＰＡＧＥ）法鉴定了各胎龄的ＣＥ 的蛋白成分差异。制备不同蛋白浓度的１４、１６、１８、２０ ｄ 胎鼠（Ｅ１４，Ｅ１６，Ｅ１８，Ｅ２０）及新生１ ｄ 鼠（Ｐ１）的ＣＥ，加入原代培养的Ｅ１８ 胎鼠小脑及脊髓神经细胞悬液中，２４ ｈ 后以微量快速自动比色法检测细胞活性，发现实验各胎龄鼠的ＣＥ均能促进培养小脑及脊髓神经元的存活，并有蛋白浓度依赖关系，各胎龄都有各自不同的最适浓度，Ｅ１４、Ｅ１６ 和Ｅ１８ 的ＣＥ 显示了更强的神经营养活性，与对照组及其它实验组相比有极显著性差异（Ｐ＜ ０．００１）。以蛋白浓度为０．４ ｇ／Ｌ的Ｅ１８ 的ＣＥ培养新生３ ｄ 鼠（Ｐ３）脊髓细胞的结果表明，此ＣＥ可促进培养脊髓神经元的成熟和分化，抑制胶质细胞的增殖。电泳结果表明，Ｅ１６ 与Ｅ１８ 的ＣＥ中含有Ｐ１ 的ＣＥ中所没有的蛋白带，分子量分别约为２５．８ ｋＤ、４５．１ ｋＤ、８９．１ｋＤ 和１７９．５ ｋＤ，为寻找新的神经营养因子提供了线索。