GDNF基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞的建立

被引：2

作者：

邓兴力 ^{[1
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刘如恩 ^{[2
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郭京 ^{[2
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冯忠堂 ^{[1
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王武 ^{[3
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雷德强 ^{[4
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李红艳 ^{[5
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陈志华 ^{[5
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机构：

[1] 昆明医学院第一附属医院神经外科

[2] 中日友好医院神经外科

[3] 中日友好医院放射诊断科

[4] 华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科

[5] 中日友好医院临床医学研究所

来源：

中风与神经疾病杂志 | 2008年 / 03期

关键词：

脑源性神经营养因子基因; 重组质粒; 中脑神经干细胞; 基因转染;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

目的建立脑源性神经营养因子(GDNF)基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞。方法以RT-PCR扩增GDNF基因编码序列,将其克隆至质粒pEGFPN1构建重组质粒pEGFPN1-GDNF,经酶切鉴定及序列分析后,以FuGENE HD转染试剂介导转染大鼠胚胎中脑神经干细胞。免疫细胞化学、western blot鉴定GDNF的表达,诱导分化后免疫细胞化学鉴定其分化能力。结果RT-PCR产物为650bp的特异片段,重组质粒pEGFPN1-GDNF经酶切产生650bp和4.7kb的片段,序列分析结果与文献报道一致。免疫细胞化学、western blot表明GDNF基因修饰细胞能正确表达GDNF且基因修饰不影响其增殖与分化。结论建立GDNF基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞,为进一步应用其开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础。

引用

页码：260 / 264

页数：5

共 2 条

[1]

Midbrain-derived neural stem cells: from basic science to therapeutic approaches [J].

Storch, A ;

Sabolek, M ;

Milosevic, J ;

Schwarz, SC ;

Schwarz, J .

CELL AND TISSUE RESEARCH, 2004, 318 (01) :15-22

[2]

Glial cell line-derived neurotrophic factor (GDNF): a drug candidate for the treatment of Parkinson’s disease.[J].R. Grondin;Don M. Gash.Journal of Neurology.1998, 3

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