靶向MDR1基因的RNAi稳定逆转结肠癌细胞的多药耐药性

被引：13

作者：

夏忠胜 ^{[1
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朱兆华 ^{[1
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陈其奎 ^{[1
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钟英强 ^{[1
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张立勇 ^{[2
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刘仲敏 ^{[2
]}

ADAM Baoling ^{[2
]}

机构：

[1] 中山大学附属第二医院消化内科

[2] Center for Biotechnology and Genomic Medicine,Medical College of Georgia

来源：

中国病理生理杂志 | 2009年 / 25卷 / 05期

关键词：

结肠肿瘤; 多药耐药性; RNA干扰; 基因,MDR1; 转染;

D O I：

暂无

中图分类号：

R735.35 [];

学科分类号：

100214 ;

摘要：

目的:探讨靶向多药耐药蛋白-1(MDR1)基因的RNA干扰(RNAi)对结肠癌细胞MDR1/P-gp依赖的多药耐药性的稳定逆转作用。方法:分别构建含编码#4029MDR1 siRNA和#4123MDR1 siRNA的质粒载体,并转染COLO320DM结肠癌多药耐药细胞,采用G418筛选克隆细胞,经实时定量RT-PCR及Western blotting鉴定阳性克隆细胞。MTT法检测细胞活力并计算各抗肿瘤药的IC50。流式细胞术检测细胞周期并计算PI/AI值。流式细胞仪测定细胞内adriamycin药物累积浓度。结果:阳性克隆细胞(clone#4029和clone#4123)的MDR1mR-NA和P-gp的表达均被抑制。COLO320DM结肠癌亲本细胞adriamycin及vincristine的IC50分别为9.616μmol/L和0.358μmol/L,而clone#4029的IC50分别降至1.094μmol/L和0.023μmol/L(P<0.01),clone#4123的IC50分别降至0.780μmol/L和0.035μmol/L(P<0.01)。COLO320DM结肠癌亲本细胞用adriamycin及vincristine处理后其PI/AI值分别为5.68及9.59,而clone#4029的PI/AI值分别降至2.74及3.59(P<0.01),clone#4123的PI/AI值分别降至2.75及3.24(P<0.01)。COLO320DM结肠癌亲本细胞用10μmol/Ladriamycin处理后细胞内adriamycin累积浓度为27.92,而clone#4029及clone#4123细胞内adriamycin累积浓度分别增加至187.24和215.57(P<0.01)。结论:稳定转染含编码MDR1siRNA的质粒载体能稳定逆转结肠癌细胞MDR1/P-gp依赖的多药耐药性。

引用

页码：898 / 903

页数：6

共 4 条

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