改换HPLC色谱柱后梯度洗脱程序调整规律的探讨

目的:探讨以C18快速色谱柱替代常规色谱柱实现HPLC快速梯度分析时,梯度洗脱程序的调整规律。方法:采用Allti- ma C18高速色谱柱（33mm×7mm,3μm;53mm×7mm,3μm）、Alltima C18常规色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）及YMC C18常规色谱柱（150mm×4.6mm,5μm）;梯度洗脱;检测波长254nm;流速为0.8～2.5mL·min-1。比较不同梯度洗脱程序下利奈唑胺及其14个有关物质的色谱行为。结果:色谱柱确定后,梯度变化率（ΔCB/ΔtG）是决定色谱系统选择性的关键因素;在利用快速色谱柱替代普通色谱柱进行分离时,应根据具体分离情况调节流速,使色谱系统达到最佳;当HPLC梯度洗脱系统的流速改变后,应根据洗脱体积（FΔtG）不变的原则重新确定梯度运行时间。结论:采用高速色谱柱时并相应地调整梯度程序,可顺利实现HPLC梯度洗脱快速分析。