人类红细胞膜带3蛋白C端域Lys892～Phe895在Cl-转运过程中作用的研究附视频

被引：7

作者：

刘利梅

傅国辉

王天英

姜晓姝

郭卓维

史从宁

机构：

[1] 哈尔滨医科大学病理生理教研室

[2] 哈尔滨医科大学病理生理教研室哈尔滨

[3] 哈尔滨

来源：

生物化学与生物物理进展 | 2003年 / 02期

基金：

国家自然科学基金重点项目;

关键词：

带3蛋白; 截断突变体; 酵母表面展示系统;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q26 [细胞生物化学];

学科分类号：

071013 [干细胞生物学];

摘要：

采用酵母表面展示系统 ,表达带 3蛋白膜段结构域 (Gln4 0 4～Val911)至酵母细胞膜 ,功能研究表明 ,表达后的膜段结构域具有离子转运的活性 ,同时 ,带 3蛋白抑制剂 4 ,4′ 二异硫氰 2 ,2′ 二黄酸芪 (DIDS)能够抑制其离子转运的功能 .利用PCR方法 ,以 pFAST Bac mdb3为模板扩增出带 3蛋白膜段结构域的 4种截断突变体 ,分别去除带 3蛋白C端域后 4个 (Ala90 8～Val911)、 16个 (Asp896～Val911)、 2 0个 (Lys892～Val911)、 32个(Asn880～Val911)氨基酸序列 ,测序后将其克隆至表达载体 pYD1上 ,构建酵母表达质粒 pYD1 Trunc4、pYD1 Trunc16、pYD1 Trunc2 0和 pYD1 Trunc32 ,诱导 4组突变体的蛋白质表达 .然后测定Cl-的转运活性 ,结果发现去除后 2 0个 (Lys892～Val911)氨基酸残基后 ,离子转运活性明显下降 ,而去除后 32个 (Asn880～Val911)后 ,离子转运没有进一步下降 ,说明Lys892～Phe895 4个氨基酸残基在带 3蛋白的离子转运过程中发挥重要作用

引用

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页数：6

共 7 条

[1]

带3蛋白C端和血型糖蛋白A相互作用及其抗原相关性的研究 [J].