多重聚合酶链反应鉴别单核细胞增生李斯特菌的研究

目的　建立一种快速有效地鉴定李斯特菌属和鉴别单核细胞增生李斯特菌 (Lm)的方法。方法　以具有李斯特菌种、属特异性的iap基因和Lm特异的溶血素基因 (hlyA)为靶目标 ,分别设计双重聚合酶链反应 (PCR)和三重PCR鉴别李斯特菌 ,并比较 2种PCR方法的特异性。结果　双重和三重PCR方法检测李斯特菌属和Lm标准株 ,均具有良好的特异性 :进行三重PCR检测 ,可出现 3个条带 ,其中 2条为Lm的特征性条带 ( 70 0 ,42 0bp) ,另 1条为其他李斯特菌的iap基因片段 ( 12 0 0bp) ,但是双重PCR不能鉴别部分Lm食品分离株 ,而三重PCR则可以鉴别。结论　建立的三重PCR法可用于李斯特菌属细菌特异性鉴定和混合培养物中Lm的特异性鉴别。