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猪链球菌2型毒力因子部分片段的克隆与表达
被引:9
作者:
徐淑菲
何孔旺
陆承平
机构:
[1] 南京农业大学动物医学院
[2] 江苏省农业科学院农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室
来源:
关键词:
猪链球菌2型;
胞外蛋白因子;
融合表达;
D O I:
暂无
中图分类号:
S852.61 [病原细菌];
学科分类号:
摘要:
根据猪链球菌2型(Streptococcussuistype2)胞外蛋白因子(extracellularfactorprotein,EF)的基因(epf)序列,设计合成一对引物,以猪链球菌2型江苏分离株SS2-H的基因组为模板,扩增epf基因1585-2547位序列,进行T/A克隆,转化入宿主菌DH5α中。提取阳性克隆质粒进行双酶切并纯化,将目的片段向克隆到表达载体pET-32a中组氨酸的下游,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导可表达分子量约为53000的融合蛋白。免疫转印分析表明,该融合蛋白具有EF的抗原表位。
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