解毒酶基因在蓝藻中的克隆与表达

被引:12
作者
闫艳春
乔传令
张媛
机构
[1] 山东农业大学遗传研究所!泰安
[2] 中国科学院动物研究所!北京
[3] 北京大学生命科学院!北京
关键词
解毒酶基因; 转基因藻; 单细胞集球藻; 接合转移; 表达;
D O I
10.13345/j.cjb.2000.01.010
中图分类号
Q815 [];
学科分类号
0836 ; 090102 ;
摘要
用抗性库蚊酯酶基因B1的cDNA片段插入质粒pRL439中的强启动子之后,再与穿梭表达载体pDC8相连构建成大肠杆菌蓝藻穿梭表达载体pDCB1,然后通过三亲接合转移法将pDCB1转入蓝藻Synechococcussp.PCC7942中,经新霉素筛选获遗传稳定的转基因藻株;纯化单藻落在液体中扩大培养,提取蓝藻质粒,Southern杂交确证B1cDNA已转入受体细胞;用酯酶的特异性底物β乙酸萘酯(βNA)检测B1的表达,转基因藻对βNA的降解明显高于野生藻,证明酯酶B1基因在转基因藻中得到表达。
引用
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