蜘蛛拖丝蛋白基因的构建及在大肠杆菌中的表达

被引：40

作者：

李敏

章文贤

黄智华

黄建坤

机构：

[1] 福建师范大学生物工程学院,福建师范大学生物工程学院,福建师范大学生物工程学院,福建师范大学生物工程学院福州,福州,福州,福州

来源：

生物工程学报 | 2002年 / 03期

关键词：

蜘蛛; 拖丝; 基因合成; 表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

蜘蛛大壶腹线产生的拖丝是非常优良的纤维蛋白 ,具有独特的强度和弹性。基于拖丝蛋白高度重复序列和部分cDNA序列 ,合成蜘蛛拖丝蛋白基因单体 ,通过头尾相连的构建策略 ,得到拖丝蛋白多聚体 ,与原核高效表达载体pET30a(+)连接 ,转化大肠杆菌BLR(DE3) ,用IPTG诱导表达。表达产物经His .Bind树脂金属螯合亲和层析一步纯化 ,纯度达 90 %以上 ,表达量为 2 0mg L。SDS PAGE和蛋白质印迹图谱显示表达产物分子量为 37kD ,其值与氨基酸组分分析结果与理论推算值基本符合

引用

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