刘寄奴抗炎组分筛选及其机制研究

被引:25
作者
章丹丹 [1 ]
潘一峰 [2 ]
唐宁 [1 ]
华晓东 [1 ]
卞卡 [1 ,3 ]
机构
[1] 上海中医药大学穆拉德中药现代化研究中心
[2] 上海现代中医药技术发展有限公司
[3] 美国德克萨斯大学休斯顿医学院综合生物及药理学系,德克萨斯大学分子医学研究所
关键词
刘寄奴总黄酮; 炎症反应; 一氧化氮; 诱导型一氧化氮合酶; 诱导型环氧合酶;
D O I
10.16305/j.1007-1334.2009.07.026
中图分类号
R285.5 [中药实验药理];
学科分类号
1008 ;
摘要
目的考察刘寄奴活性组分及其对干扰素-γ(IFN-γ)和脂多糖(LPS)协同诱导RAW264.7细胞的抗炎机制。方法应用溶剂萃取和D101大孔树脂分别制备刘寄奴各提取物和总黄酮,紫外分光光度法测定总黄酮的含量;IFN-γ和LPS协同诱导细胞炎症模型;Greissreaction法测定各提取物及总黄酮对细胞上清液中亚硝酸盐含量的影响;RT-PCR法考察总黄酮对细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、诱导型环氧合酶(COX-2)mRNA的影响;Westernblot法考察总黄酮对细胞iNOS、COX-2、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达的影响。结果刘寄奴乙酸乙酯部位与其他提取物相比,在相同剂量时对亚硝酸盐含量的抑制率最高,由此富集获得的总黄酮含量达53%。刘寄奴总黄酮呈剂量依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐的含量,并对刺激后的细胞活力有保护作用;刘寄奴总黄酮呈抑制iNOS、COX-2mRNA表达,抑制iNOS、COX-2、p-ERK的蛋白表达。结论活性导向的分离提示乙酸乙酯部位是刘寄奴抗炎活性组分之一,由此富集的总黄酮呈剂量依赖性抑制细胞上清液中亚硝酸盐含量,部分通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)中的细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路抑制iNOS和COX-2基因和蛋白的表达而达到抗炎效果。
引用
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