烟草AFLP分析体系的建立与优化

被引：17

作者：

杨友才

周清明

尹晗琪

机构：

[1] 湖南农业大学烟草工程技术研究中心

[2] 湖南农业大学

[3] 中山大学生命科学院

来源：

中国烟草学报 | 2005年 / 03期

关键词：

烟草; AFLP; 分析体系; 建立与优化;

D O I：

暂无

中图分类号：

TS413 [];

学科分类号：

0822 ;

摘要：

以10份烟草种质资源为试材,对AFLP分析过程中包括DNA的提取质量和浓度、MseⅠ/EcoRⅠ以及T4DNA连接酶的浓度、反应时间和反应温度、以及其反应体系的组成等影响因素进行了研究。建立了一种适于烟草AFLP银染技术的优化体系。该体系中各优化因素为模板DNA的用量为400ng,酶切体系中MseⅠ和EcoRⅠ各加入4U,T4DNA连接酶加入2.8U,采用酶切与连接在同一体系中一步完成,其酶切连接温度为37℃,反应时间为7h。并对预扩增、选择性扩增和银染的效果进行了检测,以引物E-ACT/M-CAC构建了烟草种质资源的AFLP指纹图谱,该图谱扩增带多,多态性强,且质量好。

引用

页码：23 / 28

页数：6

共 5 条

[1]

Evalution of the DNA fingerprinting method AFLP as a tool in lacterial taxonomy. Janssen P,Coopman R,Huys G,et al. Microbiology . 1996

[2]

AFLP: a new technique for DNA fingerprinting. Vos P,Hogers R,Bleeder M. Nucleic Acids Research . 1995

[3]

Genetic diversity and its relationship to hybrid performance in maize as revealed by RFLP and AFLP markers. Ajmon-Marsan P,Castiglion P,Fushr F,et al. Theoretical and Applied Genetics . 1998

[4]

AFLP-based genetics diversity assessment among wheat cultivars from the pacific northweat. Barrett B A,Kidweel K K. Crop Science . 1998

[5]

Cloning and mapping of variety-specific rice genomic DNA sequences: amplified fragment length polymorphisms (AFLP) from silver-stained polyacrylamide gels. Cho-Yang G U,Blair M W,Panaud O,et al. Genome . 1996

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