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利用重组分支杆菌噬菌体快速筛选耐利福平结核分支杆菌
被引:31
作者:
吕斌
符志军
徐顺清
陈志飞
李开赏
周宜开
机构:
[1] 同济医科大学环境医学研究所,武汉市结核病防治所,同济医科大学环境医学研究所,武汉市结核病防治所,武汉市结核病防治所,同济医科大学环境医学研究所
来源:
关键词:
分支杆菌噬菌体;
利福平;
药敏试验;
分支杆菌,结核;
D O I:
暂无
中图分类号:
R521 [肺结核];
学科分类号:
摘要:
目的 采用基因工程技术构建的可表达荧光素酶的结核分支杆菌噬菌体进行结核分支杆菌利福平药敏试验研究 ,建立一种特异、灵敏、快速的利福平药敏试验方法。方法 采用生物发光方法分别检测重组分支杆菌噬菌体对不同细菌在不同浓度利福平培养基中的发光水平 ,并与罗氏培养基进行药敏试验比较。结果 在不同细菌中 ,噬菌体均特异地对分支杆菌有发光反应 ,分支杆菌的发光值与大肠杆菌相比差异有显著性 ,而大肠杆菌的发光值与阴性对照差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;在各分支杆菌中 ,BCG的发光值最高 ,mc15 5次之 ,结核分支杆菌最低。在含利福平的培养基中 ,耐药结核分支杆菌的发光强度比非耐药结核分支杆菌强 ,其强度差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;通过对不同浓度利福平进行筛选试验 ,得出最适于利福平药敏试验的利福平浓度为 2 μg/ml;采用该浓度的利福平对结核分支杆菌标准株和临床分离株进行药敏试验 ,结果与罗氏培养法的结果一致。温敏噬菌体Phage88的检测灵敏度在各种分支杆菌中均大于正常噬菌体Phage 40 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。 结论重组噬菌体可特异地检测结核分支杆菌利福平耐药性 ,灵敏度高 ,可在 72h内得到结果 ,Phage 88的效果优于Phage 40 ,采用温敏株可提高检测的灵敏度和特异性。
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