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利用核定位信号筛选系统初步筛选小鼠胚胎核定位蛋白基因
被引：6
作者：
王冀姝
孙强
李荣
周鹏
韩骅
机构：
[1] 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!西安
来源：
关键词：
核定位信号;
小鼠;
胚胎;
基因克隆;
酵母;
D O I：
暂无
中图分类号：
Q785 [转化及克隆];
学科分类号：
071007 ;
0836 ;
090102 ;
摘要：
在已建立的核定位信号 (nuclearlocalizationsignal,NLS)筛选系统的基础上 ,对这一系统进行了改进并对改进的系统进行了验证。将小鼠 1 1天胚胎cDNA文库插入改进后的筛选载体的多克隆位点 ,转化酵母宿主菌。然后将约 1 0 4 个酵母克隆接种于选择性平板上进行筛选 ,得到了 2 2个可在选择性培养基上生长的克隆。分析了其中 1 8个克隆的DNA序列 ,见到 1 3个克隆含有以正确读框融合的编码NLS的基因片段。取其中 3个克隆的插入片段与绿色荧光蛋白基因融合后在哺乳类细胞内表达 ,证明了其在哺乳类细胞中的核定位功能。研究证明 ,构建的核定位信号筛选系统 ,能够有效地从cDNA文库中筛选核定位蛋白的基因
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页码：569 / 573
页数：5
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