人参皂甙Rd通过PI3K/AKT/mTOR/Hif-1α通路促进成年大鼠缺血性脑卒中后的血管发生

目的:探索人参皂甙Rd（Ginsenoside Rd,GSRd）对成年大鼠缺血性脑卒中血管发生的作用及可能机制。方法:80只成年雄性Sprague-Dawley大鼠,体重280～300 g,用线栓法建立局灶性短暂性大脑中动脉阻塞模型（focal transient middle cerebral artery occlusion,MCAO）,Sham为手术但不阻塞。随机分为四组,每组20只:Sham+生理盐水（SA）、Sham+GSRd、MCAO+SA、MCAO+GSRd。术后3 d,通过RECA-1免疫荧光组织化学染色标记血管内皮细胞、并计算梗死灶周围微血管的密度和分支点。通过Western Blot检测梗死侧皮层血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）,低氧诱导因子（hypoxia-inducibal factor 1 alpha,Hif-1α）,磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mammalian target of rapamycin,p-mTOR）,磷酸化的蛋白激酶B（p-protein kinase B,pAKT）的蛋白表达水平。结果:（1）免疫荧光组织化学染色结果显示:与MCAO+SA对照组相比,MCAO+GSRd治疗组的血管数（518.75±34.88/mm2 vs 391.40±17.66/mm2,P<0.001）和分支点（255.47±36.05/mm2 vs 203.13±12.05/mm2,P<0.01）显著增多。Sham+SA和Sham+GSRd的血管数（503.12±45.32/mm2 vs 492.18±61.93/mm2）和分支点（270.31±35.94/mm2 vs 258.59±42.25/mm2）则无显著差异;（2）Western Blot结果显示:与对照组相比,GSRd显著增加VEGF,Hif-1α,p-mTOR,p-AKT的蛋白表达水平（P<0.05）。（3）mTOR特异性阻断剂雷帕霉素抑制了GSRd对Hif-1α（P<0.01）、VEGF（P<0.05）的作用。结论:人参皂甙Rd可促进成年大鼠脑卒中后的血管发生,其对血管发生的作用可能是通过PI3K/AKT/mTOR/Hif-1α通路所介导。