棒状杆菌2,5-DKG还原酶基因在欧文氏菌中的表达

被引:5
作者
陈策实
尹光琳
机构
[1] 中国科学院上海生物工程研究中心
关键词
2.5-DKG还原酶,欧文氏菌,表达,2-酮基醛糖还原酶;
D O I
10.13345/j.cjb.1999.02.012
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
将能够在大肠杆菌内高效表达棒状杆菌2,5 DKG还原酶I基因的质粒pBL4改造成为具有链霉素抗性的质粒pBLS,采用改进的感受态转化法将pBLS导入能够利用葡萄糖高产2,5 DKG的欧文氏菌SCB125中,通过提高温度诱导,经SDS PAGE分析2,5 DKG还原酶I获得了高效表达,占菌体总蛋白的22%,不形成包涵体。体外酶活测定结果表明表达的酶具有较高的活力。同时,通过凝胶活力染色发现了宿主欧文氏菌SCB125中存在一个活力较强的2 酮基醛糖还原酶。
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