c-myb反义RNA重组载体构建及其包装细胞株的建立

被引：1

作者：

马会慧

姚集鲁

李刚

姚春斓

陈雪娟

杨绍基

机构：

[1] 中山医科大学附属第三医院传染科

[2] 中山医科大学附属第三医院传染科广东广州

[3] 广东广州

来源：

中山医科大学学报 | 2001年 / 03期

关键词：

肝纤维化; c-myb; RNA,反义; 克隆,分子; 转染;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

1001 ;

摘要：

【目的】构建反义c myb重组逆转录病毒载体并建立其包装细胞株。【方法】采用RT PCR方法 ,获取目的基因 ,通过TA克隆方法克隆入 pUC19,再反向亚克隆入逆转录病毒载体 pDOR中。采用DOTAP法将重组逆转录病毒载体转入包装细胞 ,以NIH3T3细胞为靶细胞测定产病毒滴度。【结果】序列测定结果与GenBank中序列一致。c myb基因片段已定向克隆入 pDOR。细胞转染表明 ,已形成稳定的包装细胞株PA317/pDOR myb ,产病毒滴度达 5 2× 10 4 ～ 9 5× 10 4 CFU/mL。【结论】成功构建了含有反义c myb的重组逆转录病毒质粒 ,并建立其包装细胞株

引用

页码：235 / 237

页数：3

共 6 条

[1]

C-myb modulates transcription of the alpha-smooth muscle actin gene in activated hepatic stellate cells. Buck M,Kim D J,Houglum K,et al. Am J Physiol Gatrointest Liver Physiol . 2000

[2]

The cellular basis of hepatic fibrosis:Mechanisms and treatment strategies. Friedman S L. The New England Journal of Medicine . 1993

[3]

Target site search and effective inhibition of leukaemic cell growth by a covalently closed multiple anti-sense oligonucleotide to c-myb. Moon I J,Lee Y,Kwak C S,et al. Biochemical Journal . 2000

[4]

Adenovirus-mediated expression of a ribozyme to c-myb mRNA inhibits smooth muscle cell proliferation and neointima formation in vivo. Macejak D G,Lin H,Webb S,et al. Journal of Virology . 1999

[5]

Hepatic expression of c-myb in chronic human liver disease. Kitada T,Seki S,Nakatani K,et al. Hepatology . 1997

[6]

Activation of hepatic stellate cells by TGFαand collagen type I is mediated by oxidative stress through c-myb expression. Lee K S,Buck M,Houglum K,et al. The Journal of Clinical Investigation . 1995

← 1 →