应用SYBR Green Ⅰ荧光PCR方法快速检测溶藻弧菌

被引：3

作者：

李杰 ^{[1
]}

卢昕 ^{[1
]}

徐嘉良 ^{[2
]}

阚飙 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所腹泻病室

[2] 北京工商大学食品学院

来源：

中国预防医学杂志 | 2014年 / 15卷 / 03期

关键词：

溶藻弧菌; SYBR Green I荧光PCR; toxR基因;

D O I：

10.16506/j.1009-6639.2014.03.002

中图分类号：

Q93-331 [微生物鉴定];

学科分类号：

摘要：

目的利用SYBR Green I荧光PCR反应方法建立一种准确、快速、便捷检测溶藻弧菌的方法。方法根据溶藻弧菌toxR基因保守区域设计引物,建立检测溶藻弧菌SYBR Green I荧光PCR检测方法,利用8株溶藻分离株以及26株其他种属细菌进行特异性和灵敏度评价。利用含不同溶藻弧菌基因组拷贝数(自2×106拷贝/μl至2×100拷贝/μl)的样品进行灵敏度评价。同时,对平行样品分别应用普通PCR法和TaqMan探针实时PCR法进行检测,并对3种检测方法的特异度及灵敏度进行比较。结果基于toxR基因的SYBR Green I荧光PCR检测对全部8株溶藻弧菌检测为阳性,检测下限为2×101拷贝/μl,而26株其他种属细菌均为阴性。与普通PCR法和TaqMan探针实时PCR法比较,SYBR Green I荧光PCR检测方法灵敏度更高。结论用toxR基因作为靶基因检测溶藻弧菌的单重SYBR Green I荧光PCR检测方法,提升了检测速度,有良好的实际应用前景。

引用

页码：195 / 198

页数：4

共 9 条

[1]

溶藻弧菌毒力相关基因的检测与保藏方法的研究.[D].韩佳丽.广东海洋大学.2011, 06

[2]

重要致病性弧菌TaqMan实时PCR检测方法的建立.[D].王海波.山东大学.2009, 06

[3] 基于一种新基因的溶藻弧菌毒力菌株检测方法的建立 [J].