人红细胞生成素单克隆抗体的制备、鉴定及应用研究

被引：2

作者：

施水良

曾怡

金以丰

谢弘

不详

机构：

[1] 南京大学生物化学系

[2] 中国科学院上海细胞生物学研究所南京

[3] 南京

[4] 上海

来源：

生物工程学报 | 1996年 / 01期

关键词：

人红细胞生成素(hEPO); 单克隆抗体;

D O I：

10.13345/j.cjb.1996.01.011

中图分类号：

Q813.2 [细胞融合工程];

学科分类号：

0836 ; 090102 ;

摘要：

用rhEPO作为抗原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与X63Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞融合,用碱性PAGE方法进一步分离并纯化的rhEPO,包被PVC板,对杂交瘤用ELISA方法进行筛选,获得两株稳定分泌抗hEPO单抗的杂交瘤细胞株。经鉴定分别属于IgG1、IgG2b,轻链均为k链,Kd分别为5.53×10-10mol/L和1.34×10-10mol/L。用Western blot方法证明两者对hEPO具有高度的专一性,能特异地识别rhEPO和尿源hEPO。所制备单抗可作为亲和层析的配体,用于再生障碍性贫血病人尿中EPO及哺乳类工程细胞所表达的hEPO的分离、纯化,并可用于hEPO的定量检测。

引用

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