腺病毒介导的双自杀基因对直肠癌细胞的杀伤作用

目的　探讨直肠癌的基因治疗方法。方法　用重组腺病毒介导外源胞嘧啶脱氨酶(CD)基因、单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV tk)基因转移到人直肠癌细胞系HR 834 8,通过细胞集落形成实验、细胞存活率测定 (MTT法 ) ,检测、分析CD和HSV tk双自杀基因系统对肿瘤细胞的作用。结果重组腺病毒介导的CD和HSV tk自杀基因可在HR 834 8细胞高效表达。用腺病毒穿梭质粒pAdCMV Link1(CD +tk)、pAdCMV Link1(- )、pAdCMV Link1(CD)、pAdCMV Link1(tk)重组腺病毒感染HR 834 8细胞 ,不加 5 氟胞嘧啶 (5 FC)、环氧鸟苷 (GCV) ,各组肿瘤细胞的集落形成和存活率的差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。应用 5 FC、GCV后 ,pAdCMV Link1(CD +tk)转染组细胞集落形成和存活率显著低于对照组和pAdCMV Link1(- )转染组 (P <0 0 1) ,也低于pAdCMV Link1(CD)、pAdCMV Link1(tk)转染组(P <0 0 5 )。CD和 5 FC、HSV tk和GCV系统联合作用较单一自杀基因系统对HR 834 8直肠癌细胞的集落形成、细胞生长有更显著的抑制作用 ,对肿瘤细胞有更强的杀伤能力和“旁观者效应”。　结论CD和HSV tk双自杀基因联合作为肿瘤基因治疗的一种手段和方法 ,较单一自杀基因具有更强的抗肿瘤作用