DNA染料结合环介导等温扩增技术检测志贺氏菌死活细胞

被引:4
作者
李月
王丽
孙远明
钟青萍
机构
[1] 华南农业大学食品学院
关键词
ethidium monoazide; 环介导等温扩增技术(LAMP); Shigella; 死活细胞;
D O I
10.13386/j.issn1002-0306.2011.08.082
中图分类号
TS207.4 [食品的微生物检验];
学科分类号
083201 ;
摘要
建立了一种DNA染料(EMA)结合环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的分析方法(EMA-LAMP),用于有效检测区分病原微生物志贺氏菌的死活细胞。基于志贺氏菌ipaH基因的六个区域设计特异性的引物,检测志贺氏菌的死活细胞。结果表明:浓度为40μg/mL的EMA能够有效抑制109CFU/mL的死细胞扩增,而对相同浓度的活菌扩增没有影响。分析表明,该方法可以有效区分细菌的死活细胞,克服了传统PCR无法区分死活细胞的弊端,同时EMA-LAMP检测方法耗时短,检测灵敏度高,是一种能够有效鉴别病原菌死活细胞的新方法。
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