人β-神经生长因子基因真核细胞表达载体的构建与鉴定

被引：2

作者：

李甫强

王廷华

董坚

梅妍

周鸿鹰

项涛

羊惠君

机构：

[1] 四川大学华西医学中心人体解剖教研室,四川大学华西医学中心人体解剖教研室,昆明医学院附属一院肿瘤研究中心,四川大学华西医学中心人体解剖教研室,四川大学华西医学中心人体解剖教研室,四川大学华西医学中心人体解剖教研室,四川大学华西医学中心人体解剖教研室

来源：

四川解剖学杂志 | 2005年 / 01期

关键词：

β-神经生长因子; R-TPCR; 克隆; 真核表达载体;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

1001 ;

摘要：

目的　构建人β-神经生长因子基因(β-NGF)的真核细胞表达载体,为运用进行基因治疗和细胞移植的研究奠定基础。方法　采用RT-PCR方法从人脑肿瘤旁组织的mRNA中扩增人β-神经生长因子的基因片段,将目的基因、真核表达载体 pcDNA3 同时经 HindⅢ和 Apa双酶切、纯化、连接、转化及筛选而构建重组载体 pcDNA3-β NGF;经酶切和测序对重组体进行分析和进一步鉴定。结果　RT-PCR产物琼脂糖电泳结果显示:在预期位置有阳性条带。重组载体经酶切、测序等分析插入的基因片段为表达β-NGF的基因。结论　人β- NGF基因重组真核细胞表达载体 pcDNA3-β- NGF构建成功,为进一步开展β-NGF基因治疗脑部疾患、脊髓损伤修复等研究奠定基础。

引用

页码：2 / 5

页数：4

共 6 条

[1]

Structure of mouse 7 s NGF: a complex of nerve growth factor with for binding proteins. Bax B,Blundell T L,Murray R J,et al. Structure . 1997

[2]

Nerve growth factor: two receptors, multiple function. Frade J M,Bard Y A. Bioessays . 1998

[3]

Update of the NGF saga. Levi-Montalcini R,Toso R D,Valle F D,et al. Journal of Neurosurgical Sciences . 1995

[4]

Gene therapy in the adult primate brain: intraparenchymal grafts of cells genetically modified to produce nerve growth factor prevent cholinergic neuronal degeneration. Tuazynski M H,Roberts J,Senut M C,et al. Gene Therapy . 1996

[5]

Application of Gene therapy to the CNS. Blomer U,Naldini L,Verma I M,et al. Human Molecular Genetics . 1993

[6]

The Effects of Raav2-Mediated NGF Gene Delivery in Adult and Aged Rats. Wu K,Meyer C A,Guerra N K,et al. Molecular Therapy . 2004

← 1 →