在产毒素大肠杆菌(ETEC)肠毒素基因内设计合成三对引物,建立了三对引物同时PCR检测ETEC的方法,一次PCR即可扩增出627bp(LTh)、240bp(STIa)和169bp(STIb)三种肠毒素基因片段,可同时分型检测出LTh、STIa、STIb、LTh-STIa、LTh-STIb五种基因型的ETEC,与非ETEC对照菌无交叉反应,最小检出量为10cfu,显示了很高的特异性和敏感性。将建立的方法用于山东省六县市623例大肠杆菌致泻标本的检测,阳性率为40.3%,并能鉴别ETEC的基因型,为ETEC腹泻的分子流行病学研究提供了有效的检测手段