核桃芽总RNA提取及RT-PCR

被引:12
作者
宋艳波 [1 ]
梅霞 [1 ]
吴国良 [2 ]
牛洪斌 [3 ]
机构
[1] 山西农业大学生命科学学院
[2] 河南农业大学园艺学院
[3] 河南农业大学小麦工程技术研究中心
关键词
核桃; 芽; RNA提取; 硼砂; RT-PCR;
D O I
暂无
中图分类号
S664.1 [核桃(胡桃)];
学科分类号
090201 [果树学];
摘要
为了从核桃芽体内提取高质量的RNA,以便进行核桃成花基因克隆研究,针对核桃芽体内富含多酚等次生代谢物的特点,在总结他人研究基础上对SDS法和CTAB法及试剂盒提取法进行了改良和比较。凝胶电泳检测表明:Spectrum Plant Total RNA试剂盒提取法及以pH 9.0硼砂为缓冲液的改良CTAB法和SDS法所提取RNA的28SrRNA和18SrRNA条带清晰,且28SrRNA的亮度约是18SrRNA的2倍,说明所提RNA完整性较好;紫外光谱分析显示,3种方法的OD260/OD280分别为1.99、1.96、1.77,OD260/OD230均>2.0,RNA产率依次为360、180、75μg/(g.FW)。综合检测结果认为:改良CTAB法和改良SDS法所提RNA的完整性和纯度均能满足基因克隆等的研究,是一种适合核桃芽体内RNA提取的经济而有效的方法。
引用
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页码:25 / 28+54 +54
页数:5
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