高亲和力抗血管紧张素Ⅱ抗血清的制备——五种免疫原的制备及其免疫效果的比较

为了提高放射免疫分析法（RIA）的灵敏度,达到度量人外周血浆中血管紧张素Ⅱ（ATII）的要求,必需采用亲和力特别高的特异性抗ATII 抗血清。我们使用不同的载体和结合方法,制备了五种ATIIa 免疫原,以提高其抗原性。它们是:1)聚乙烯吡咯酮吸附血管紧张素II 酰胺（ATIIa）;2)碳二亚胺缩合兔血清白蛋白与ATIIa;3)戊二醛（GDA）结合牛血清白蛋白（BSA）与ATIIa;4)GDA 结合多聚赖氨酸（PL）与ATIIa;5)碳二亚胺缩合琥珀酰化多聚赖氨酸（PL-Succ）与ATIIa。在分组免疫家兔（皮内多点或多途径注射）后,用生物鉴定、被动血球凝集试验和放射免疫稀释曲线法检测及跟踪抗血清的抗ATII 效价。并用RIA 法以Scatchard 图求亲和常数K?统计显示在组间存在显著差别,以BSA-GDA-ATIIa 及PL-Succ-ATIIa 效果为佳。在3～5个月内成功地获得了Ka>1010升/克分子,适用于ATII 的放射免疫测定的一些抗血清。其中之一已经满意地用于建立一个特异、灵敏的RIA,可以直接测定人体外周血中低浓度的ATII。另一些也有相似的能力。对工作中涉及一些问题,如免疫原制备、影响抗血清质量的因素以及抗ATII 检测方法等,作了初步的比较和讨论。本试验结果,从抗原消耗量、抗体产生速度、成功率及抗血清的效价和亲和力等方面,看来较某些报告有优越之处。