Genistein、Na3Vo4对椎间盘软骨细胞作用效应的研究

目的探讨染料木黄酮(Genistein)和正钒酸钠(sodium orthovanadate,Na3Vo4)对椎间盘软骨终板软骨细胞的作用。方法采用酶消化法培养大鼠椎间盘软骨终板软骨细胞,将不同浓度的Genistein(15μmol/L、35μmol/L、55μmol/L)、Na3Vo(410μmol/L、20μmol/L、30μmol/L)加入到培养的第Ⅲ代软骨细胞中,培养7d;MTT法检测软骨细胞增殖率,RT-PCR检测Ⅱ型、Ⅸ型胶原和Aggrecan mRNA的表达,定量RT-PCR检测IGFR、PTPn1 mRNA的表达。结果干预7d后,15μmol/L Genistein组各项指标与模型组比较变化不明显(P>0.05);35μmol/L Genistein组与模型组比较,软骨细胞增殖率、Ⅱ型胶原及aggrecan mRNA表达显著降低(P<0.01),IGFR mRNA表达较模型组有所降低,但无显著性差异(P>0.05);55μmol/L Genistein组与模型组比较,软骨细胞增殖率、aggrecan基因表达显著下降(P<0.01),Ⅸ型胶原、IGFR mRNA表达较模型组有所降低(P<0.05);Genistein各浓度组PTPn1 mRNA表达无显著变化(P>0.05)。与模型组比较,10μmol/L Na3Vo4组各项检测指标变化不明显(P>0.05);30μmol/L Na3Vo4组Ⅱ、Ⅸ型胶原mRNA表达明显降低(P<0.01);20μmol/L及30μmol/L Na3Vo4组软骨细胞增殖率明显下降(P<0.01),aggrecan及PTPn1 mRNA表达显著降低(P<0.05),IGFR mRNA表达无显著变化(P>0.05)。结论Genistein可特异性抑制PTKs中IGFR基因表达,适当剂量Na3Vo4可抑制PTPs中PTPn1的基因表达,降低软骨细胞生物学功能。