血液直接PCR方法在猪嗜血支原体检测中的应用

为临床上能快速准确检测猪嗜血支原体感染,建立了一种检测猪嗜血支原体的血液直接PCR方法。该方法能特异性地扩增猪嗜血支原体16SrRNA基因中的一段396bp序列,而对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等没有扩增到目的条带;该方法能检测到每微升抗凝血中猪嗜血支原体的最低拷贝数为5.52×101 copies,与常规PCR相当;应用血液直接PCR和常规PCR对100份抗凝血样进行检测,阳性检出率分别为65%和69%,差异不显著(P>0.05)。结果表明,血液直接PCR方法具有良好的特异性、较高的灵敏度和较快的检出速度,适用于临床上对猪嗜血支原体感染进行快速确诊和流行病学调查。