山核桃RAPD反应体系的优化

被引:12
作者
王正加
黄坚钦
郭传友
杨萍
王华芳
机构
[1] 北京林业大学生物科学与技术学院
[2] 浙江林学院生命科学学院
[3] 南京林业大学森林资源与环境学院
[4] 北京林业大学生物科学与技术学院 北京浙江林学院生命科学学院浙江临安
[5] 浙江临安
[6] 江苏南京
[7] 北京
基金
浙江省自然科学基金;
关键词
林木遗传育种学; 山核桃; 随机扩增多态性DNA(RAPD); 反应体系; 优化;
D O I
暂无
中图分类号
S664.1 [核桃(胡桃)];
学科分类号
090201 ;
摘要
建立山核桃RAPD反应优化体系是进行山核桃遗传多样性分析的前提。通过对影响PCR扩增结果的主要因子的组合研究,确定了山核桃Caryacathayensis的最适反应体系和扩增程序,即在20μL反应体系中,含2 5mg·L-1(50ng)模板,2 0μL10×Buffer,16 67pmol·s-1TaqDNA聚合酶;各0 2mmol·L-1dNTPs,3 0mmol·L-1MgCl2,0 3μmol·L-1引物。扩增程序为:94℃预变性300s,94℃变性30s,38℃退火30s,72℃链延伸90s,38次循环,72℃后延伸420s。图5表2参6
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