蓝细菌ORF469的分子克隆和缺失突变工程株的构建

被引：4

作者：

吴庆余

Wim.F.J.Vermaas

机构：

[1] 清华大学生物科学与技术系,DepartmentofBotany,ArizonaStateUniversity,TempeAZ,USA北京

来源：

生物工程学报 | 1996年 / 03期

基金：

国家杰出青年科学基金; 美国能源部;

关键词：

ORF469分子克隆; 缺失突变; 不依赖光的叶绿素生物合成;

D O I：

10.13345/j.cjb.1996.03.013

中图分类号：

Q782 [基因载体];

学科分类号：

摘要：

PCR扩增了蓝细菌Synechocystis sp.PCC 6803的ORF469(编码469个氨基酸的开放阅读框),进一步以pUC118为载体将其克隆到E.coli中,构建了pOQ2质粒。通过DNA体外重组,以红霉素抗性基因取代部分克隆化ORF469片段,又构建了缺失ORF469片段(保留部分上游和下游序列)的pOQ22质粒。用pOQ22质粒转化Synechocystis sp.PCC 6803野生株细胞,获ORF469缺失突变工程株,它在红霉素抗性培养基上生长正常。对缺失突变工程株DNA的PCR和Southern blot分析证明,Synechocystis sp.PCC 6803的ORF469已被删除。色素测定结果揭示Synechocystis sp.PCC 6803中ORF469表达产物控制细胞内不依赖光的叶绿素生物合成。

引用

页码：311 / 317+378 +378-379

页数：9