β-葡萄糖苷酶产生菌、发酵条件的优化、粗分离及其特性研究

通过筛选,获得了一株β—葡萄糖苷酶的高产菌株米曲霉F97。经过单因子及正交实验,确立了产酶的最适培养基配方:麸皮4%,KH2P040.1%,蛋白胨0.1%,水杨苷0.05%,并按所优化的发酵产酶条件于30℃,150r/min,经88h培养,发酵液最终酶活达184.18u/mL。利用所选菌株,以麸皮为培养基,经8天培养,酶活达2592u/mg干曲。β—葡萄糖苷酶发酵液经35%和75%饱和度的硫酸铵分级沉淀,再经透析脱盐,酶活回收率达68.91%,纯化倍数为3.27倍。其冷冻干燥制品酶活力单位为97.23u/mg,比活为189·11u/mg。该β—葡萄糖苷酶制品在离子强度为0.1M醋酸缓冲液中的酶活力最高,该酶的最适反应pH为4.8,最适反应温度为60℃。这与文献报道的以黑曲霉产的β—葡萄糖苷酶的特性相符〖1〗。