同型半胱氨酸诱导血管平滑肌细胞组织因子表达增强

目的:研究同型半胱氨酸(Hcy)诱导人血管平滑肌细胞(VSMCs)组织因子(TF)表达的作用,及其对核转录因子(NF-κB)活性和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法:培养人脐动脉VSMCs,将不同浓度的Hcy和/或NF-κB抑制剂PDTC与VSMCs孵育不同时间,用RT-PCR方法检测TF mRNA表达,用Western blotting检测核NF-κB水平,用流式细胞术(FCM)检测细胞表面TF蛋白水平和iNOS水平。结果:10μmol/LHcy作用4h,TF表达开始升高,500μmol/L达峰值,Hcy能显著诱导VSMCs表达TF mRNA;对照组VSMCs细胞膜表面有低水平的TF蛋白表达,10μmol/LHcy作用4h即可诱导VSMCs表达TF蛋白,500μmol/L达高峰,Hcy能显著诱导VSMCs表达TF;500μmol/LHcy作用1h,细胞核NF-κB水平明显升高,Hcy可诱导VSMCsNF-κB活化;NF-κB抑制剂PDTC可明显抑制Hcy对TF mRNA和细胞TF表达的诱导作用;单独Hcy作用不能诱导VSMCs表达iNOS。结论:Hcy能显著诱导VSMCs表达TF,增强VSMCs的NF-κB活化,从而介导TF基因表达和蛋白合成,通过NF-κB介导VSMCs表达TF可能是Hcy导致AS、血栓形成的重要机制。