RT-PCR方法检测贝类中诺沃克样病毒的研究

被引：7

作者：

张颖 ^{[1
]}

吴风亮 ^{[2
]}

机构：

[1] 中国环境管理干部学院生态学系

[2] 河北农业大学农村发展学院

来源：

食品科学 | 2008年 / 05期

关键词：

诺沃克样病毒; 反转录PCR; 贝类; 检测;

D O I：

暂无

中图分类号：

R155.5 [食品卫生与检验];

学科分类号：

100403 ;

摘要：

目的:本研究从病毒富集和核酸提取两方面进行探索,旨在建立一个反转录(RT)PCR技术检测贝类中诺沃克样病毒(NLVs)的方法。方法:利用脊髓灰质炎病毒作为参照毒株,优化了甘氨酸缓冲液-聚乙二醇(PEG)病毒浓缩方法;同时比较了异硫氰酸胍法、SDS-蛋白酶K法、Trizol-异丙醇法、试剂盒法四种RNA提取方法;对市售贝类样品进行了检测,并利用基因测序对阳性样品进行验证。结果:本研究采用的pH9.5甘氨酸缓冲液-16%聚乙二醇病毒浓缩法,病毒的回收率为16.8%,利用Trizol-异丙醇法提取RNA,检出限为8.1×102RT-PCR50/5g贝肉,实际检测贝类样品25件,其中3件样品为阳性,基因测序结果亦证实为阳性。结论:本研究建立了一个灵敏度较高、较为有效的RT-PCR技术检测贝类中诺沃克样病毒的方法。

引用

收藏

页码：347 / 351

页数：5

相关论文

共 10 条

[1] 90例非轮状病毒腹泻患儿粪便中诺瓦克样病毒的检测 [J].

刘满清 ;

谭慧 ;

王斌 ;

周玲 ;

康世秀 ;

彭劲松 ;

杨北方 ;

杨继红 .

疾病监测, 2005, (07) :362-363

[2] 群体性诺瓦克样病毒性胃肠炎疫情分析 [J].

沈纪川 ;

刘于飞 ;

周秀珍 ;

李泽荣 ;

蒋力云 ;

吴新伟 ;

狄飚 ;

王鸣 ;

不详 .

中国公共卫生 , 2005, (05) :610-611

[3] 用RT-PCR和ELISA对暴发性急性胃肠炎事件中诺沃克样病毒检测的比较 [J].

蒋力云 ;

吴新伟 ;

刘于飞 ;

张伟 ;

刘远 ;

沈纪川 ;

李泽荣 ;

狄飚 ;

周秀珍 ;

王鸣 .

中国人兽共患病杂志, 2005, (03) :247-249

[4] 用RT-PCR法检测食品中诺沃克样病毒 [J].

陈广全 ;

饶红 ;

张惠媛 ;

付溥博 ;

冯骞 .

食品与发酵工业, 2004, (12) :106-112

[5] 贝类产品中诺沃克病毒的实时荧光RT-PCR检测方法研究 [J].

潘良文 ;

张舒亚 ;

李晓虹 ;

严罗美 ;

李树清 ;

王巧全 .

检验检疫科学, 2004, (05) :1-3

[6] 福州地区腹泻患者诺瓦克样病毒感染的分子流行病学特点 [J].

陈军林 ;

王滔 ;

高建民 ;

陈骏扬 ;

蔡忠钦 ;

林瑜 ;

不详 .

中国人兽共患病杂志 , 2003, (02) :83-84+107

[7] 长春市儿童医院1998～2001年婴幼儿杯状病毒腹泻流行病学研究 [J].

谢华萍 ;

方肇寅 ;

王光 ;

孙利炜 ;

吕红霞 ;

Zhong WM ;

Tai JH ;

林思恩 ;

童志礼 ;

章青 ;

Glass RI ;

Jiang X .

病毒学报, 2002, (04) :332-336

[8] 太原市部分人群诺瓦克样病毒血清抗体水平的调查 [J].

靖宇 ;

钱渊 ;

吴立平 ;

马建瑞 .

中华儿科杂志, 1999, (09) :37-39

[9] 北京地区人群诺瓦克样病毒血清抗体水平调查 [J].

靖宇 ;

钱渊 ;

王洛平 .

病毒学报, 1998, (04) :38-44

[10] 在我国腹泻患儿中发现诺瓦克样病霉感染 [J].

方肇寅，温乐英，晋圣瑾，赵章华 .

病毒学报, 1995, (03) :215-219