双苯氟嗪抗大鼠全脑缺血再灌注所致海马CA1区神经元凋亡

目的　研究L 型钙通道拮抗剂双苯氟嗪在大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区神经元中的抗凋亡作用及与CD95 (Fas)分子启动的死亡信号转导通路之间的关系。方法　四血管阻断法制备全脑缺血再灌注损伤模型 (缺血 15min ,再灌注 3d) ,双苯氟嗪 (2 0 ,4 0和 80mg·kg-1)每日灌胃给药 1次。激光扫描共聚焦显微镜 (Confocal)和HE染色观察海马CA1区神经元细胞形态学改变 ,流式细胞仪 (FCM)分析海马DNA含量变化 ;Western blotting和RT PCR方法检测CD95 (Fas)分子启动的死亡信号转导通路相关蛋白Fas,FasL和Caspase3蛋白及mRNA表达变化。结果　全脑缺血再灌注后海马CA1区神经元呈现典型凋亡细胞形态学改变 ,凋亡细胞百分率明显上升 (P <0 0 1)。双苯氟嗪明显改善海马CA1区神经元形态 ,显著降低凋亡细胞百分率 (P<0 0 1)。Westernblotting及RT PCR结果显示 ,双苯氟嗪显著降低CD95 (Fas)分子相关蛋白Fas、FasL和Caspase3在蛋白及核酸水平的表达。结论　双苯氟嗪对缺血性脑损伤的保护作用可能通过抑制CD95 (Fas)分子启动的死亡信号转导通路 ,从而发挥其抗脑缺血再灌注损伤作用。