DNA芯片联合检测耐利福平与异烟肼结核分枝杆菌及其临床应用

被引：8

作者：

叶淦湖 ^{[1
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麦宝媛 ^{[1
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刘芳 ^{[2
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欧阳新根 ^{[1
]}

李健青 ^{[1
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廖生赟 ^{[3
]}

机构：

[1] 东莞市石碣人民医院

[2] 东莞市高步医院检验科

[3] 亚能生物技术深圳有限公司

来源：

中华医院感染学杂志 | 2009年 / 19卷 / 09期

关键词：

结核分枝杆菌; rpoB、katGi、nhA基因; 利福平; 异烟肼; DNA芯片;

D O I：

暂无

中图分类号：

R450 [];

学科分类号：

100215 ;

摘要：

目的开发快速检测耐利福平与异烟肼结核分枝杆菌rpoB、katGi、nhA基因突变的DNA芯片。方法根据结核分枝杆菌rpoB、katGi、nhA基因序列设计探针并制作基因芯片,从临床样品中分离出结核分枝杆菌的基因组DNA,PCR扩增含有上述几个基因突变位点的特异DNA片段,并事先在PCR引物的5′端作生物素标记,然后与膜条芯片上的检测特异突变位点的寡核苷酸探针进行杂交,通过生物素-链霉亲和素-过氧化物酶体系显色,直接观察突变情况,以此来判断耐药结果。结果35个利福平和异烟肼单耐药或多药耐药的结核分枝杆菌中有82.9%用芯片法检出的结果与药敏培养法一致;其中利福平耐药样品突变检出率为100.0%;有20.0%异烟肼耐药的样品芯片未检出突变,可能是突变发生在芯片检测位点范围之外。结论用DNA芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性,具有较高的特异性和敏感性,可用于临床结核分枝杆菌耐药性检测。

引用

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