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nNOS片段在大肠杆菌中的表达及特异性抗体的制备
被引：1
作者：
陈强
朱敏生
沈月
许祥裕
潘英
朱东亚
丁树标
智刚
Ｋｉｍ Ｓ Ｌａｕ
Ｊａｍｅｓ Ｔ Ｓｔｕlｌ
机构：
[1] 南京军区军事医学研究所
[2] 中国药科大学新药研究中心
来源：
关键词：
nNOS,特异性抗体,重组表达,肌肉;
D O I：
暂无
中图分类号：
R392-33 [免疫学技术、设备及实验方法];
学科分类号：
100102 ;
摘要：
目的：为了制备ｎＮＯＳ特异性抗体。方法：用ＰＣＲ的方法克隆出ｎＮＯＳ７０８～８８１ａａ片段的编码基因并将之插入ｐＥＴ２８ａ原核表达载体。结果：成功地在大肠杆菌中获得高效表达。经ＨｉｓＴａｇ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和电泳回收法得到纯蛋白，将此蛋白免疫兔，制备出ｎＮＯＳ特异性抗体，抗体效价可达１∶８０００。利用该抗体成功地检测了正常肌肉和ＤＭＤ肌肉中ｎＮＯＳ的含量变化，证实ＤＭＤ肌肉中ｎＮＯＳ的含量明显低于正常肌肉。结论：制备的抗体具有较高的特异性，对ｎＮＯＳ的免疫检测具有重要应用价值
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