L-精氨酸和尼莫地平对脂多糖诱导的内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的　观察L 精氨酸和尼莫地平对脂多糖 (LPS)诱导的内皮细胞 (EC)的单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)mRNA和蛋白表达的影响。方法　在EC培养基中分别加入LPS、LPS +L 精氨酸和LPS+尼莫地平 ,培养 8小时 ,用异硫氢酸胍法提取细胞的总RNA ,用γ 32 P末端标记的MCP 1寡核苷酸探针进行Dotblot分析 ,检测EC的MCP 1mRNA的表达。同时用夹心酶联免疫吸附实验检测各组EC条件培养基 (CM)中的MCP 1蛋白含量。用免疫细胞化学方法检测EC的MCP 1蛋白的表达。结果　斑点杂交显示 ,EC暴露于LPS后 ,其斑点的积分吸光度 (A)值为 3 14 ,对照组 (条件培养基 )为 1 2 4 ,而LPS +L 精氨酸组和LPS +尼莫地平组的积分A值分别为 1 4 3和 1 65。ELISA检测结果显示 ,LPS组的CM中MCP 1蛋白含量为 ( 6 2 9± 0 5 3 )ng/ml,对照组为 ( 2 3 2± 0 .16)ng/ml,两者比较F =3 0 9.81,P<0 .0 1,而LPS +L 精氨酸组和LPS +尼莫地平组分别为 ( 7 63± 0 .3 1)及 ( 2 75± 0 .3 7)mg/ml,与LPS组比较F =3 0 9.81,P <0 .0 1。免疫细胞化学显示 ,MCP 1为胞浆表达 ,LPS组EC对MCP 1多克隆抗体呈强阳性反应 ,而对照组、L 精氨酸组和尼莫地平组EC胞浆中的MCP 1表达呈弱阳性。结论　L 精氨酸和尼莫地平能明显抑制LPS诱导的ECMCP 1的表达。