中国麻疹野病毒基因型快速诊断方法的建立

被引：7

作者：

周剑惠

陈超

刘桂艳

许强

张燕

朱贞

张运祥

田鑫

曹凤瑞

宋和

徐羽迪

王兆南

于瑞兰

徐力

中山哲夫

许文波

机构：

[1] 吉林省疾病预防控制中心,吉林省疾病预防控制中心,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,吉林大学生命科学学院,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,吉林省疾病预防控制中心,吉林省疾病预防控制中心,吉林省疾病预防控制中心,长春市绿园区疾病预防控制中心,长春市绿园区疾病预防控制中心,长春市朝阳区疾病预防控制中心,长春市朝阳区疾病预防控制中心,吉林大学生命科学学院,日本北里生命科学研究所,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所长春,长春,北京,长春,北京,北京,长春,长春,长春,

来源：

中国计划免疫 | 2004年 / 06期

关键词：

麻疹病毒; 逆转录聚合酶链反应; 限制性内切酶片段长度多态性分析; 电泳; 序列分析; 敏感性; 特异性;

D O I：

暂无

中图分类号：

R446.5 [微生物学检验];

学科分类号：

摘要：

研究建立了一种适用于中国现流行麻疹野病毒基因型的基因型别筛查、定型的分析方法 ,即逆转录聚合酶链反应限制性内切酶片段长度多态性分析 (RT PCR RFLP)。首先对RT PCR方法的敏感性和特异性进行了实验证明 ,对 1 1株麻疹病毒提取核糖核酸 (RNA) ,逆转录套式PCR扩增后全部出现阳性特异条带。在同样的反应条件下 ,扩增 6种不同基因型麻疹病毒 9株 ,同时又扩增其它非麻疹病毒。结果 9株 6种基因型麻疹病毒RT PCR均呈现阳性条带 ,说明本研究采用的RT PCR方法敏感。而非麻疹病毒RT PCR结果为阴性 ,均未见阳性条带 ,说明该RT PCR方法特异。根据H1 和H2 基因型麻疹病毒分别被不同的限制性内切酶SalⅠ和BamHⅠ切割成不同大小的基因片段 ,建立RFLP快速基因定型方法。之后 ,对建立的RFLP方法的特异性和敏感性进行了实验证明。利用该方法对吉林省连续两年分离到的 9株麻疹野病毒 [已经过中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家麻疹实验室脱氧核糖核酸 (DNA)序列分析证实为H1 基因型 ]进行验证 ,结果均为H1 基因型麻疹病毒 ,证实该PCR RFLP结果与序列分析结果一致 ,也说明该方法敏感。同时 ,又对 7种不同基因型麻疹病毒应用PCR RFLP方法进行实验 ,结果只有H1 和H2 基因型麻疹病毒被限制性内切酶SalⅠ和BamH

引用

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页数：5

共 1 条

[1] 麻疹野病毒H1基因型在中国流行的分析 [J].

许文波 ;

朱贞 ;

张珍英 ;

王同展 ;

蒋小泓 ;

王常银 ;

何维宽 ;

王建国 ;

李聪勇 ;

郑蕾 ;

凌华 ;

李平 ;

刘桂艳 ;

田宏 ;

周淑洁 ;

田疆 ;

王步安 .

中国计划免疫, 2003, (01) :3-10

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