改良组织块消化法建立大鼠气道平滑肌细胞模型

目的:建立改进大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)的体外培养方法,为相关研究提供实验材料。方法:将组织块连续贴壁进行细胞原代培养,胰酶消化传代培养,差速贴壁进行细胞纯化,形态学及免疫细胞化学染色法进行细胞鉴定。MTT法检测PDGF-BB诱导的ASMC增殖。结果:成功培养大鼠ASMC,以改良组织块消化法最为理想。第四代平滑肌细胞纯度可达95%以上。相差显微镜下培养细胞呈典型"峰谷状"生长。免疫荧光化学染色显示特异性平滑肌肌动蛋白阳性表达。随着PDGF浓度的升高(2～80ng/ml),MTT比色A490值呈上升趋势。与对照组相比较,80ng/ml、20ng/mlPDGF-BB组有统计学意义(P<0.01)。结论:改良组织块消化法可缩短培养周期,在充分利用标本的基础上获得大量气道平滑肌细胞。