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微载体技术体外扩增人骨髓间充质干细胞
被引：19
作者：
单建林
许建中
周强
王序全
朱灏
赵敏
机构：
[1] 第三军医大学西南医院骨科,第三军医大学西南医院骨科,第三军医大学西南医院骨科,第三军医大学西南医院骨科,第三军医大学西南医院骨科,第三军医大学西南医院骨科重庆,重庆,重庆,重庆,重庆,重庆
来源：
关键词：
微载体;
生物反应器;
人间充质干细胞;
细胞培养;
D O I：
暂无
中图分类号：
R329 [人体组织学];
学科分类号：
100107 [人体解剖与组织胚胎学（人体解剖学、组织与胚胎学）];
摘要：
目的 :建立一种快速、大量扩增人骨髓间充质干细胞 (hMSCs)的方法 ,以满足组织工程技术治疗大段骨缺损对细胞数量的需要。方法 :普通培养的第 3代人MSCs1× 10 7个及 0 5gCytodex3微载体 ,加入有 10 0ml培养基的搅拌生物反应器中培养 ,在前 6h ,每隔半小时以 40r/min的速度搅拌 2min ,以后连续搅拌。于培养的第 1、 3、 5、7、 9、 11d取样在相差显微镜下动态观察细胞生长情况 ,最后进行细胞表面生长因子的检测。结果 :接种 2 4h后 87%的MSCs细胞贴附于微载体并铺展 ,3d后生长加速 ,约 8～ 9d后细胞生长达最大值。最终细胞收获密度为接种时的约 15～ 2 0倍。流式细胞仪检测显示 ,所培养的MSCs均一的表达CD2 9和CD44 ,而CD3 4、CD45和HLA DR阴性。结论 :应用微载体技术可以大量、快速的培养扩增人骨髓间充质干细胞 ,细胞表面抗原特性不变 ,能够满足组织工程技术治疗大段骨缺损的需要
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