Au纳米颗粒HBV DNA基因探针的制备及其在目视化检测HBV DNA中的应用

被引：5

作者：

习东 ^{[1
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宁琴 ^{[1
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卢强华 ^{[2
]}

姚凯伦 ^{[2
]}

刘祖黎 ^{[2
]}

罗小平 ^{[1
]}

机构：

[1] 华中科技大学同济医学院附属同济医院

[2] 华中科技大学物理系

来源：

中国生物医学工程学报 | 2006年 / 01期

关键词：

金纳米颗粒; 基因探针; 乙肝病毒; 目视化;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

摘要：

制备金(gold,Au)纳米颗粒乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(hepatitis B virus deoxynucleic acid,HBV DNA)基因探针,研究其在目视化检测HBV DNA中的应用。Au纳米颗粒通过金-硫(Au-S)共价键结合烷氢硫醇修饰的寡核苷酸,制备检测探针。用荧光标记法检测Au纳米颗粒表面寡核苷酸的覆盖率和与其互补的寡核苷酸的杂交效率。检测探针与固定在尼龙膜上的捕捉探针构成双探针,用斑点杂交法检测HBV DNA,加入银离子(Ag+)-对苯二酚液染色观察结果。制备的Au纳米颗粒粒径为(12±5)nm,分散良好,在520nm有最大吸收峰,经寡核苷酸修饰后,最大吸收峰改变为524nm。Au纳米颗粒表面寡核苷酸的最大覆盖率为(132±10)条,最大杂交效率为(22±3)%。在尼龙膜上用斑点杂交法可检出低至10fmol的合成靶DNA,可目视化检出乙肝患者血清中HBV DNA的PCR产物。Au纳米颗粒HBV DNA基因探针可用于目视化检测HBV DNA,此方法具有敏感性高、特异性好、简单、价廉的特点,可望在许多领域,尤其是在多基因检测芯片上有潜在的应用价值。

引用

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