菲降解菌的筛选鉴定及其降解酶基因的研究

被引:24
作者
马迎飞
刘训理
邵宗泽
不详
机构
[1] 国家海洋局第三海洋研究所海洋所海洋生物遗传资源重点实验室
[2] 山东农业大学林学院
[3] 国家海洋局第三海洋研究所海洋所海洋生物遗传资源重点实验室 福建厦门山东农业大学林学院山东泰安
[4] 山东泰安
[5] 福建厦门
关键词
菲; 生物降解; 16S rDNA; 双加氧酶; 斑点杂交;
D O I
暂无
中图分类号
X172 [环境微生物学];
学科分类号
083001 [环境科学];
摘要
经过富集从活性污泥中筛选出两株菲降解菌WSCII和WSCIII,经16SrDNA鉴定,它们分别属于鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonassp. )和假单胞菌属(Pseudomonassp. ),在28℃下4d内对菲( 0. 6g/L)的降解率分别达到了70. 9%和78. 1%;在LB、萘和菲为碳源的培养条件下,测得菌体的双加氧酶比活力不同.在菲的诱导下,两株菌的双加氧酶比活力最高,而以LB和萘为碳源时酶的比活力较低,其中WSCII在萘中不能生长;这表明该酶在两菌中皆为底物诱导表达.以其它菌的萘双加氧酶基因大亚基片段做模板制备异源探针,与两菌总DNA进行斑点杂交;结果表明,这两株菌可能含有不同的菲双加氧酶基因.利用简并引物进行PCR扩增菲双加氧酶,结果仅能从WSCIII的总DNA中扩增得到目的片段,序列分析证明,该基因与已报道的(P. putidaNCIB9816 -4, AF491307 )双加氧酶同源性最高为98%. 图5参10
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共 1 条
[1]
A rapid method for naphtalene dioxygenase assay in whole cells of naphtalene cis -dihydrodiol dehydrogenase blocked Pseudomonas fluoresecens: Screening of potential inducers of dioxygenase activity[J] D. Cidaria;F. Deidda;A. Bosetti Applied Microbiology and Biotechnology 1994,