农杆菌介导的红曲菌T-DNA插入突变库的构建及色素突变子的性质分析

被引:30
作者
邵彦春
王汝毅
丁月娣
陈福生
谢笔钧
机构
[1] 华中农业大学食品科技学院
关键词
红色红曲菌; 表型; 桔霉素;
D O I
暂无
中图分类号
TS201.3 [食品微生物学];
学科分类号
083606 [微生物发酵工程];
摘要
以农杆菌EHA105为介导,将带有潮霉素抗性基因和gus基因的T-DNA片段转化到红色红曲菌(Monascusruber)中。通过转化条件的优化,成功构建了含有5132个转化子的T-DNA插入突变库。根据菌落颜色与色素分泌情况筛选到50株色素突变子,聚合酶链式反应(PCR)表明上述突变子均有T-DNA片段插入。经5代的继代培养后,94%的突变子具有稳定性(潮霉素抗性)。对突变子产色素和桔霉素能力的分析表明其分泌次生代谢产物的能力发生了较大变化。本方法的建立,为进一步深入研究红曲菌的代谢调节和基因功能奠定了基础。
引用
收藏
页码:247 / 255
页数:9
相关论文
共 8 条
[1]
根癌农杆菌介导的球毛壳菌遗传转化及T-DNA插入突变体的获得 [J].
高兴喜 ;
杨谦 .
微生物学报, 2005, (01) :129-131
[2]
红曲霉SAGE文库中双标签的制备研究 [J].
熊勇华 ;
许杨 ;
赖卫华 ;
不详 .
中国生态农业学报 , 2004, (01)
[3]
红曲菌cDNA消减文库的构建 [J].
赖卫华 ;
许杨 ;
熊勇华 .
菌物系统, 2003, (03) :466-473
[4]
根癌土壤杆菌介导的丝状真菌转化 [J].
王政逸 ;
王秋华 ;
李德葆 .
菌物系统, 2003, (02) :339-344
[5]
红曲色素的色调及发酵工艺条件对色调的影响 [J].
许赣荣 ;
顾玉梅 ;
吴苗叶 ;
穆晓清 .
食品与发酵工业, 2002, (07) :10-14
[6]
Agrobacterium -mediated transformation as a tool for functional genomics in fungi[J] Caroline B. Michielse;Paul J. J. Hooykaas;Cees A. M. J. J. Hondel;Arthur F. J. Ram Current Genetics 2005,
[7]
Stable transformants of the azaphilone pigment-producing Monascus purpureus obtained by protoplast transformation and Agrobacterium -mediated DNA transfer[J] Sonia Campoy;Flor Pérez;Juan F. Martín;Santiago Gutiérrez;Paloma Liras Current Genetics 2003,
[8]
Efficient Agrobacterium tumefaciens-mediated gene disruption in the phytopathogen Mycosphaerella graminicola[J] Lute-Harm Zwiers;Maarten A. De Waard Current Genetics 2001,