HLA-DR快速基因分型PCR-SSP方法的建立

目的：探讨应用于器官移植配型及疾病相关性分析的方法及基本数据，建立一种高分辨率、高特异性、简单、快速、方便的ＨＬＡ ＤＲ基因分析方法。方法：利用ＤＲ１～ＤＲ１８序列特异性引物及１对内对照引物，采用序列特异性引物 聚合酶链式反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｉｍｅｒｓ，ＰＣＰ ＳＳＰ）技术对２２份国际标准细胞株ＤＮＡ及２０例未知ＤＲ型别的临床血液标本进行ＨＬＡ ＤＲ基因分析，扩增条件为：变性９４℃，６０ｓ；退火６５℃，６０ｓ；延伸７２℃，６０ｓ。２５个循环后，７２℃保温７ｍｉｎ。结果：对各个标准ＤＮＡ的分型结果显示，准确率及重复率均为１００％，无假阳性及假阴性。结论：该方法快速、简便、灵敏、重复性好，结果易于判断，适合临床器官移植组织配型、疾病相关性分析、法医鉴定及人类学研究等。