环介导恒温扩增技术快速检测非洲猪瘟病毒

被引：17

作者：

王彩霞

刘建

林祥梅

吴绍强

机构：

[1] 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所

来源：

动物医学进展 | 2010年 / 31卷 / 02期

关键词：

非洲猪瘟病毒; 环介导恒温扩增; 敏感性; 特异性;

D O I：

10.16437/j.cnki.1007-5038.2010.02.007

中图分类号：

S852.651 [];

学科分类号：

摘要：

以人工合成的非洲猪瘟病毒(ASFV)P72全长基因为模板,利用在线软件Primer Explorer4设计环介导恒温扩增(LAMP)的内、外引物,通过对反应体系和反应条件进行优化,建立了ASFV的LAMP检测方法,同时进行了敏感性和特异性试验。结果表明,所建立的LAMP检测方法最低检测限可达10拷贝质粒DNA,且具有良好的特异性,LAMP产物的酶切鉴定也验证了反应的特异性。对凝胶电泳后紫外观察、肉眼观察颜色变化、生成沉淀观察以及实时荧光PCR扩增曲线Ct值判定等不同判定方法进行比较表明,以上结果判定方法各有其优缺点,其中荧光PCR的敏感性最高,染色法相对较方便直观,电泳法敏感性稍低。

引用

页码：15 / 19

页数：5

共 8 条

[1] 猪繁殖与呼吸综合征病毒反转录环媒恒温检测方法的建立 [J].

陈长木 ;

崔尚金 ;

张超范 ;

鄢明华 .

中国预防兽医学报, 2009, 31 (05) :378-382

[2] 非洲猪瘟传入我国危害风险分析 [J].

王君玮 ;

张玲 ;

王志亮 ;

王华 ;

包静月 .

中国动物检疫, 2009, 26 (03) :63-66

[3] 非洲猪瘟病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立 [J].

江彦增 ;

朱鸿飞 .

中国畜牧兽医, 2009, (02) :72-74

[4] 简便敏感的环介导等温扩增基因诊断新技术 [J].

肖斌 ;

朱永红 ;

邹全明 .

中华检验医学杂志, 2005, (07) :761-763

[5] 应用PCR检测非洲猪瘟病毒的研究 [J].

蒋正军 ;

龚振华 ;

尹燕博 ;

王树双 ;

蔡丽娟 ;

郭福生 ;

陆明哲 ;

孙承英 ;

宣华 .

中国预防兽医学报, 2000, (S1) :114-117

[6] 非洲猪瘟研究进展 [J].

曲连东 ;

于康震 .

中国兽医科技, 1998, (11) :42-43

[7] Development of a loop-mediated isothermal amplification for rapid detection of orf virus [J].

Tsai, Su-Ming ;

Chan, Kun-Wei ;

Hsu, Wei-Li ;

Chang, Tien-Jye ;

Wong, Min-Liang ;

Wang, Chi-Young .

JOURNAL OF VIROLOGICAL METHODS, 2009, 157 (02) :200-204

[8]

The development and evaluation of a loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method for detection of Babesia spp. infective to sheep and goats in China[J] . Guiquan Guan,Alain Chauvin,Jianxun Luo,Noboru Inoue,Emmanuelle Moreau,Zhijie Liu,Jinliang Gao,Oriel M.M. Thekisoe,Miling Ma,Aihong Liu,Zhisheng Dang,Junlong Liu,Qiaoyun Ren,Yurong Jin,Chihiro Sugimoto,Hong Yin.Experimental Parasitology . 2008 (1)

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