油茶随机扩增多态DNA条件的研究

被引：15

作者：

张云

黄儒珠

刘大林

齐清琳

刘国敏

叶锋

机构：

[1] 福建师范大学生物工程学院

[2] 福建省林业厅

[3] 福建闽侯桐口国有林场

来源：

福建林业科技 | 2003年 / 02期

关键词：

油茶; 随机扩增多态DNA; 反应条件;

D O I：

10.13428/j.cnki.fjlk.2003.02.002

中图分类号：

S794.4 [油茶];

学科分类号：

摘要：

以改进的CTAB法提取油茶嫩叶总DNA,进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析,分别测试了Mg2+浓度、引物浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度和TaqDNA聚合酶用量对反应结果的影响,确定了油茶RAPD分析的最适反应体系:在25μlPCR反应体积中,含20ng模板DNA,2 5mmol·L-1MgCl2,0 2mmol·L-1dNTP,0 3μmol·L-1引物,1UTaqDNA聚合酶。扩增程序为:94℃预变性180s;94℃变性60s,37℃退火90s,72℃延伸120s,反应40个循环;最后在72℃延伸5min。

引用

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